小胶质细胞的特征

神经免疫学是研究神经和免疫系统相互作用的学科, 在开发过程中, 体内平衡和对损伤或感染的反应. 免疫细胞在调节神经网络中起着关键作用, for example, 小胶质细胞的突触修剪是神经可塑性的重要组成部分. Injury, 感染或体内平衡的丧失可导致神经炎症和小胶质细胞的激活, 哪一个依次吞噬死亡或垂死的神经元和感染因子. 慢性神经炎症被认为是许多神经退行性疾病的基础, 比如老年痴呆症, 小胶质细胞的长时间激活对神经元网络的危害在哪里.

The Incucyte® 活细胞分析系统可以广泛的形态和功能表征小胶质细胞. 完全自动化的图像采集和分析有利于小胶质细胞出气细胞凋亡神经元或吞噬生物制品的可视化和动力学分析. 小胶质细胞对趋化细胞因子的迁移反应可以通过活细胞趋化迁移和侵袭检测来显示和量化. 非干扰试剂可以保持细胞形态,而不受终点分析的干扰和限制, 因此,允许更多的数据收集从每个细胞不间断孵化直接从您的培养箱内96和384孔吞吐量.  


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介绍神经免疫功能的孵化细胞检测方法

Incucyte吞噬作用分析

  • 生成定量的,可重复的和具体的测量吞没细胞
  • 用图像和电影来观察和验证动态吞噬细胞清除细胞碎片和死亡神经元
  • 用卵母细胞对目标进行无干扰标记® pHrodo® 橙色细胞标记试剂盒
  • 使用您选择的微孔板格式的模型,有效地研究吞噬过程的全过程

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Incucyte趋化性试验

  • 链接实时趋化测量到形态的视觉评估,并获得深刻的表型洞察
  • 用细胞保留,高重复性的96孔分析方法分析敏感和罕见的细胞
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实时活细胞分析揭示神经系统疾病和损伤的复杂性

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神经科学家的活细胞分析:用于诱导多能干细胞和原代细胞模型

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关键优势

观察并证实被小胶质细胞吞噬

  • 用pH敏感荧光探针成像和电影观察小胶质细胞吞噬作用.
  • 凋亡细胞可被吞噬, cell debris, 蛋白质聚集物和生物颗粒.

Figure 1. 观察并证实被小胶质细胞吞噬. ipsc来源的小胶质细胞(Axol BioSciences)吞噬pHrodo Orange标记的凋亡的Neuro2A细胞的延时可视化.  图像证实凋亡靶细胞进入小胶质细胞的细胞质.  用培养细胞pHrodo Orange细胞标记试剂盒标记Neuro2A靶细胞,用staurosporine诱导细胞凋亡.

小胶质细胞吞噬和排出细胞作用的实时定量

从卵母细胞中引出的荧光信号的自动分割® pHrodo® 橙色的试剂

实时分析凋亡的Neuro2A细胞或共轭的β淀粉样蛋白聚集物的吞噬反应

卵母细胞橙黄标记试剂盒
评价吞噬调节因子的作用机制

Figure 2. 小胶质细胞吞噬作用的实时定量. ipsc来源的小胶质细胞(Axol Bioscience)吞噬pHrodo标记的凋亡神经元(neuro2a)的代表性荧光图像. An increase in intracellular orange fluorescence was observed as target cells were internalized into acidic phagosomes; the segmentation mask is shown as the cyan outline. pHrodo标记的Neuro2A细胞的出气细胞增多是细胞数量依赖性的. pHrodo标记的Aβ聚集物的吞噬作用具有时间和浓度依赖性.

Figure 3. 吞噬调节机制的评价. BV-2效应细胞efferocy糖凋亡的Neuro2A细胞(左侧图)或E. 大肠杆菌生物制品(中间面板).  细胞松弛素D(顶部图)可引起对排出细胞和吞噬细胞的浓度依赖性抑制, 产生的IC50值为0.16 µM and 1.分别5µM.  In contrast, cilengitide, aVb3和aVb5整合素的抑制剂, 选择性地减弱排出细胞增多(IC50值为0.17 µM), 而在最高浓度(100µM)时对吞噬作用几乎没有或几乎没有影响。. 这些数据支持整合素在排出细胞作用所需的细胞相互作用中的作用, 但不是在细菌的吞噬作用中.

评估小胶质细胞的趋化和迁移

图像和影像观察小胶质细胞趋化

每96孔趋化板仅利用1000 - 5000个细胞, 理想的低细胞使用率罕见, 昂贵的原代细胞群

Figure 4. 评估小胶质细胞的趋化和迁移. 孵化细胞ClearView平板上ipsc衍生的小胶质细胞(CDI)图像. 毛孔用蓝色圈出(左图). 小胶质细胞向补体组分5a (C5a)的迁移具有时间和浓度依赖性(C5a).

监测分化或激活后的形态变化

追踪单核细胞向小胶质细胞分化过程中的形态学变化

Figure 5. ipsc衍生单核细胞(Axol BioScience)向小胶质细胞分化的形态变化可视化. 注意小胶质细胞的不同外观.  12天后,红色箭头突出细胞呈分枝状, 而黄色箭头显示的是更大的扁平变形虫细胞. 每2天用分化培养基喂养细胞14天, 以及每6小时放大20倍获得的相位图像.

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猫. No.

Photocytosis

Incucyte® pHrodo® 橙色细胞吞噬标记试剂盒

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Incucyte® pHordo® 红细胞标记试剂盒

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Chemotaxis

Incucyte® 趋化性软件模块

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Incucyte® ClearView 96孔趋化板

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Incucyte® ClearView 96孔趋化性板-案例10个板

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所有应用程序

Incucyte® SX5活细胞分析系统
包括图像采集和分析系统:

  • 4x, 10x和20x的目标
  • 控制器与16.4 TB storage
  • 高清三色绿色/橙色/近红外光模块

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