通过实时活细胞分析了解b细胞适应性免疫

b细胞

B细胞位于适应性免疫系统的中心,负责产生针对侵袭性病原体的抗原特异性免疫球蛋白. B细胞的活化和增殖对抗体的分泌至关重要, 但持续的刺激也可以导致B细胞白血病和淋巴瘤的生存和生长, 比如霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤.

的Incucyte® 活细胞分析系统已被用于评估B细胞的关键功能,包括激活 & 聚类和抗体内化分析, 以及通过凋亡和免疫细胞杀伤分析评估B细胞癌的细胞死亡.


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探讨免疫学

激活 & 聚类

非粘附性b细胞系的增殖. 相衬图像定量显示了b细胞系will - 2ns细胞的增殖.  正如预期的那样,起始汇流与播种密度有关.  通过在每口井中播种已知数量的细胞来验证合流测量, 允许沉淀,然后使用相位对比算法量化.  除了, 细胞随后通透,测定ATP含量,提供二次读数.  合流率与细胞数或ATP含量有很强的相关性.

细胞凋亡(Annexin V Green)

检测细胞毒刺激后B细胞的凋亡情况. WIL2-NS B淋巴瘤细胞在含有Incucyte的培养基中暴露于载体或喜树碱(1µM) 24h后的代表性图像® 绿色试剂.  时间进程描绘了绿色荧光的增加,从Incucyte发出® 绿色试剂, 说明喜树碱诱导外化磷脂酰丝氨酸随时间和浓度增加. 

免疫细胞死亡

测定白血病细胞的ADCC. 表达NucLight的Ramos B淋巴细胞的混合相和荧光图像® 红色核标记存在于免疫细胞中, 无论未处理或存在IL-2 (10 ng/ml) & IL-12 (10 ng/mL)或利妥生(15 ng/mL - 100 ug/mL). 细胞毒性是根据红色荧光强度的损失来量化的.

量化抗体内化

临床使用的抗体Rituxan的内化. 用Incucyte处理30K/孔的Raji (B细胞样)细胞® FabFluor标记的利妥昔单抗(10 ng/mL至10µg/mL). 在12小时内,每30分钟使用20x物镜拍摄高清相位和红色荧光图像. 所有数据显示为至少4口井±SEM的平均值, 时间过程数据以标准化红色区域显示(红色区域/相位区域).

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